精密吸取1.2中的高效混合对照品溶液1、2、液相5、色谱时测10、法同15、定鱼20μL,腥草按1.4色谱条件分别进样测定,芩蓝以待测化合物的合剂质量浓度(x)为横坐标,色谱峰面积(y)为纵坐标进行线性回归,中种计算线性方程和相关系数。成分
将1.2中的高效混合对照品溶液用50%甲醇溶液逐级稀释,在1.4色谱条件下测定,液相以3倍信噪比对应的色谱时测质量浓度作为检出限,以10倍信噪比对应的法同质量浓度作为定量限。7种待测成分的定鱼线性范围、线性方程、相关系数、检出限及定量限见表1。
由表1可知,7种待测化合物在各自的质量浓度范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数均大于0.999,方法的检出限和定量限均满足鱼腥草芩蓝合剂中7种化合物的检测需要。
取鱼腥草芩蓝合剂样品,按照1.3样品处理方法制备样品溶液,分别在配制完成后第1、2、4、8、12、24h进样,测定各待测化合物的色谱峰面积。绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷、槲皮苷、汉黄芩苷、槲皮素和汉黄芩素色谱峰面积测定结果的相对标准偏差分别为1.78%、0.81%、0.74%、0.93%、1.21%、1.01%、1.22%,表明样品溶液在24h内稳定性良好。
取鱼腥草芩蓝合剂样品,按1.3方法平行制备6份样品溶液,在1.4色谱条件下分别进样测定,计算绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷、槲皮苷、汉黄芩苷、槲皮素和汉黄芩素的质量浓度,结果见表2。
由表2可知,绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷、槲皮苷、汉黄芩苷、槲皮素和汉黄芩素测定结果的相对标准偏差为1.23%~1.76%,表明该方法精密度较好,满足测定要求。
精密量取6份鱼腥草芩蓝合剂样品各1mL,分别精密加入绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷、槲皮苷、汉黄芩苷、槲皮素和汉黄芩素单标储备液各1.0、1.0、2.0、0.2、5.0、0.2、0.5mL,按照1.3样品处理方法制备加标样品溶液,在1.4色谱条件下分别进样测定,计算样品加样回收率,结果见表3。
由表3可知,样品加标平均回收率为在98.17%~101.48%,表明该方法准确性良好。
建立了高效液相色谱法同时测定鱼腥草芩蓝合剂中绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷、槲皮苷、汉黄芩苷、槲皮素和汉黄芩素含量的方法。所测7种成分涉及4种药材中的活性成分,涵盖了多类指标成分,包括2种苯丙素和5种黄酮,为鱼腥草芩蓝合剂的质量控制提供了参考方法。
相关链接:绿原酸,连翘酯苷A,汉黄芩苷,汉黄芩素
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